奇怪的maplot与degs沿着对角线躺着
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@ Federico-alessandro-25010
最后4周前见过

亲爱的生物导体用户,

我目前正在利用利马重新处理一些(不是那么)旧的微阵列数据最初使用以下平台获取:Agilent-026652全人类基因组微阵列4x44K v2比较肿瘤样本和附近的匹配的“健康”区域,在同一活检。

我对常规基因表达的感兴趣,但通常在预处理步骤中得到真正奇怪的Maplots(和非常压缩的欺骗块)。这是一个例子:原始数据的Boxplots一个肿瘤样本的原始数据的MAPLOT与其匹配的健康样品Boxplots背景减去数据用于一个肿瘤样本的背景减去数据的MAPLOT与其匹配的健康样品定量标准化数据的Boxplots用于一个肿瘤样本的定量标准化数据的MAPLOT与其匹配的健康样品

看起来典型的大部分高度表达的不变基因完全缺失,而所有的桌子都被“推”朝着情节的两个对角线上......从未见过这样的东西......你觉得这个吗?生物学上可靠吗?也许杂交或扫描的一些问题?

受欢迎的任何帮助/建议/评论比我更经验的人是受欢迎的。

非常感谢!

我认为问题是在生物学或湿实验室步骤中,而不是在编码中。但是,这里是我使用的(非常重要的和几乎标准的)代码:

库(Limma)targets = Readtargets(“targets.txt”,Row.names =“Samplenumber”)RAW = READ.maimages(目标,源='Agilent.Median',Green.Only = True)#这里我生成一些QC原始数据rap_bgcorrited = backgroundcorrect(原始,方法=“normexp”,offset = 50)#这里我生成一些qc-divolted data raw_bgandnormalized = normalizebetweenArrays的一些qc曲线(Raw_bgcorrect,方法=“smalyile”)#这里我生成一些qc标准化数据的曲线
林马微阵列Agilentchip.马图正常化•136次观看
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@ gordon-smyth
最后看2小时前
威奇,墨尔本,澳大利亚

像阵列杂交失败一样看待我。阵列似乎基本上没有信号,除了每个阵列上的几个异常值之外,所有探针强度都处于相同的低电平。

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谢谢你的意见。杂交失败也是我的嫌疑人,但我对专家的意见感觉更好:-)顺便说一下,阵列内的安捷伦控制探针的分析似乎证实了这一点。再次感谢你!再见

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